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NRAMP-2试剂盒标本激活方法及检测程序

放大字体  缩小字体 发布日期:2022-01-19 19:15:30    浏览次数:67
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NRAMP-2试剂盒标本激活方法及检测程序

NRAMP-2试剂盒标本激活方法:


1. 将450ul 标本稀释液加入到一支 1.5ml 进口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血浆标本。


2. 加20ul 1 N HC I ,盖紧,上下混匀。 2 - 8 ℃ 放置60± 2 分钟。


3. 加20ul 1 N NaOH, 盖紧,上下混匀。


4. 即用,或放-20/-70 ℃ 保存3 天。计算结果时乘 以稀释倍数 50 。 ( 注意:不同的标本E2F1 的水平可能有较大差异,请根据实际情况灵活掌握稀释度)


5. 细胞培养上清或组织匀浆 10 倍稀释 (410ul 的标本稀释液+ 50ul 样本+ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。


检测程序:


1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品(已激活) 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。


2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。


3. 每孔中加入第一抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。


4. 洗板:同前。


5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。


6. 洗板:同前。


7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。


8. 每孔加入100ul 终止液混匀。


 
(文/小编)
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