黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
小鼠血清淀粉样蛋白(mouse SAA)
小鼠S-100蛋白(mouse S-100)
小鼠性激素结合球蛋白(mouse SHBG)
小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD)
小鼠生长抑素(mouse Somatostatin)
小鼠生长抑素受体亚型(mouse SSTR2)
小鼠干细胞生长因子(mouse SCF)
小鼠基质细胞衍生因子-1(mouse SDF-1)
小鼠基质细胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a)
小鼠基质细胞衍生因子-1R(mouse SDF-1R)
小鼠可溶性E-选择素(mouse sE-Selectin/sCD62E)
小鼠可溶性L-选择素(mouse sL-Selectin/sCD62L)
小鼠可溶性P-选择素(mouse sP-Selectin/sCD62P)
小鼠P物质(mouse Substance P)
小鼠催乳素(mouse PRL)
小鼠孕酮(mouse PROG)
小鼠睾酮(mouse TESTO)
小鼠胸腺活化调节趋化因子(mouse TARC)
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(mouse TAT)
小鼠组织因子(mouse TF)
小鼠组织因子抑制物(mouse TFPI)
小鼠转化生长因子-β1(mouse TGF-β1)
小鼠转化生长因子-β2(mouse TGF-β2)
小鼠可溶性粒细胞靶受体(mouse sTREM-1)
小鼠端粒酶(mouse Telomerase)
小鼠Toll样受体-2(mouse TLR-2)
小鼠Toll样受体-4(mouse TLR-4)
小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-1(mouse TIMP-1)
小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-2(mouse TIMP-2)
小鼠肿瘤坏死因子-a(mouse TNF-a)
小鼠肿瘤坏死因子-b(mouse TNF-b)
