高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果、应用广的灭菌方法。
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有下排式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器两大类。下排式压力蒸汽灭菌器又包括手提式和卧式两种。
(1)下排气压力蒸汽灭菌器，下部有排气孔，灭菌时利用冷热空气的比重差异，借助容器上部的蒸汽压迫使冷空气自底部排气孔排出。灭菌所需的温度、压力和时间根据灭菌器类型、物品性质
包装大小而有所差别。当压力在102.97～137.30kPa时，温度可达121～126℃，15～30分钟可达到灭菌目的。
(2)预真空压力蒸汽灭菌器，配有真空泵，在通入蒸汽前先将内部抽成真空，形成负压，以利蒸汽穿透。在压力105.95kPa时，温度达132℃，4～5min即可灭菌。
注意事项：
（1）灭菌包不宜过大过紧(体积不应大于30cm×30cm×30cm)，灭菌器内物品的放置总量不应超过灭菌器柜室容积的85%。各包之间留有空隙，以便于蒸汽流通、渗入包裹中央，排气时蒸汽迅速排出，保持物品干燥。
(2)盛装物品的容器应有孔，若无孔，应将容器盖打开。
(3)布类物品放在金属、搪瓷类物品之上。
(4)被灭菌物品应待干燥后才能取出备用。
(5)灭菌锅密闭前，应将冷空气充分排空。
（6）随时观察压力及温度情况。
(7)注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器是否处于良好的工作状态。灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归“0”位后才可打开盖或门。
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