二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供稳定的控制，以便于其研究工作的进展;
二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范，并能够定期消除污染，以保护研究成果，防止样品损失。
二氧化碳培养箱基本工作原理
水套式二氧化碳培养箱的温度是通过电热丝给水套内的水加热，再通过箱内温度传感器来检测温度变化，使箱内的温度恒定在设置温度。
气套式二氧化碳培养箱的加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，又叫六面直接加热。
气套式与水套式相比，具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。箱内温度一般设定在37℃左右。
二氧化碳培养箱控制二氧化碳的浓度是通过二氧化碳浓度传感器来进行的。二氧化碳传感器用来检测箱体内二氧化碳浓度，将检测结果传递给控制电路及电磁阀等控制器件，如果检测到箱内二氧化碳浓度偏低，则电磁阀打开，二氧化碳进入箱体
内，直到二氧化碳浓度达到所设置浓度，此时电磁阀关闭，箱内二氧化碳切断，达到稳定状态。二氧化碳采样器将箱内二氧化碳和空气混合后的气体取样到机器外部面板的采样口，以随时用二氧化碳浓度测定仪来检测二氧化碳的浓度是否达到要求。
目前大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95%左右，但开门后湿度恢复速度很慢)。
因为湿度蒸发面积越大，越容易达到相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。所以湿度蒸发面积大的培养箱较湿度蒸发面积小的培养箱容易保持相对饱和湿度。
一定要做好使用前的准备工作
二氧化碳培养箱应由专人负责使用，操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后，不要随意扭动，以免影响箱内温度，二氧化碳浓度，湿度的波动，同时降低机器的灵敏度。
箱子的放置要水平，避免阳光直射和灰尘等，要保证仪器周围的气流循环，后部及侧面应留出5 cm的空隙。加装稳压电源保证电源电压波动不超过220 V±10%。
所加入的水必须是蒸馏水或无离子水，防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用，经常检查箱内水是否足够，水位应加至“水位指示灯”灭灯时为止。使用前箱内应用消毒酒精或碘溶液彻底擦洗，防止其他微生
物污染，导致实验失败。在房间安装空调，使环境温度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必须是纯净的，否则降低二氧化碳传感器的灵敏度和污染二氧化碳过滤装置。
